顯微鏡中的二向色鏡主要用于對(duì)于不同波長(zhǎng)光的分束。當(dāng)使用二向色鏡時(shí)，它不僅僅會(huì)影響光束的傳播方向，還會(huì)影響它的波前。我們制作濾光片的時(shí)候會(huì)鍍上薄膜來得到需要的過濾波段。涂層產(chǎn)生的應(yīng)力會(huì)導(dǎo)致基材的輕微彎曲或者曲率的不同。二向色鏡的彎曲對(duì)于反射的影響比透射大得多。對(duì)于透過二向色鏡的光束而言，彎曲僅僅會(huì)導(dǎo)致輕微的色散，導(dǎo)致光束有可以忽略的像差。這也就解釋了為什么傳統(tǒng)的熒光顯微鏡為什么不重視平整度這個(gè)參數(shù)，因?yàn)榘l(fā)射信號(hào)是透過二向色鏡的。二向色鏡的輕微彎曲雖然在傳統(tǒng)的光學(xué)系統(tǒng)上不會(huì)造成很明顯的影響，但是會(huì)對(duì)更先進(jìn)的顯微系統(tǒng)的成像造成不可忽視的負(fù)面影響。這也就促使著濾光片廠家研發(fā)出更加適合先進(jìn)顯微系統(tǒng)的平整濾光片。

DCS-120應(yīng)用于96孔板掃描成像
DCS-120共聚焦熒光壽命成像顯微鏡系統(tǒng)可采用軟件控制的電動(dòng)載物臺(tái)進(jìn)行升級(jí)，應(yīng)用于96孔板的掃描成像。在此應(yīng)用中，96孔板放置在電動(dòng)載物臺(tái)上，通過DCS-120的共聚焦掃描頭對(duì)第一個(gè)孔位的特定區(qū)域進(jìn)行掃描成像，然后通過軟件將孔板的位置移動(dòng)到下一個(gè)孔位，每次移動(dòng)的距離和兩個(gè)孔位之間的距離一致，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)96孔板的熒光壽命成像。系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于每次采集的數(shù)據(jù)都是基于孔位內(nèi)一個(gè)焦平面薄層，因此，熒光壽命衰減曲線不會(huì)因?yàn)閞e-absorption和re-emission影響。此外，轉(zhuǎn)動(dòng)去極化影響的可能性也可以通過高數(shù)值孔徑的物鏡進(jìn)行消除。獲取的數(shù)據(jù)通過SPCM操作軟件的Mosaic FLIM模式進(jìn)行保存。采集數(shù)據(jù)的同時(shí)，初步的熒光壽命圖像也會(huì)同時(shí)進(jìn)行顯示。精確的多指數(shù)熒光壽命數(shù)據(jù)分析可以通過SPCImage分析軟件進(jìn)行分析。關(guān)于本應(yīng)用的更詳細(xì)信息，可以查看以下內(nèi)容：
1. DCS-120 Confocal and